近日，华南农业大学教授吴鸿团队首次揭示了茶枝柑中CrcCCoAOMT7-1和CrcCCoAOMT7-2两种甲基转移酶在重要生物活性成分多甲氧基黄酮生物合成中的关键作用，并解析了其作用机制，为药用植物多甲氧基黄酮的生物合成机制提供了新见解。相关成果发表于《国际生物大分子杂志》。

CrcCCoAOMT7-1/7-2参与类黄酮甲基化作用模式图。研究团队供图

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多甲氧基黄酮作为一类具有显著抗癌活性的植物次生代谢产物，受到广泛关注。柑橘果皮中特异性积累丰富的多甲氧基黄酮，甲基化修饰是多甲氧基黄酮生物合成的关键步骤。然而，目前报道的柑橘O-甲基转移酶（OMT）的功能不足以阐明多甲氧基黄酮的完整甲基化过程。

该研究基于团队此前发表的茶枝柑基因组和代谢组，进一步通过比较分析茶枝柑果实不同发育阶段多甲氧基黄酮的积累规律与OMTs基因的表达模式，从柑橘中鉴定了两个全新的属于 CCoAOMT-like 亚组的咖啡酰辅酶A OMT（命名为CrcCCoAOMT7-1/7-2）。

体外酶功能分析表明，CrcCCoAOMT7-1对黄酮底物具有强烈偏好性，可催化邻羟基类黄酮的3-、6-、8- 、3'- 和4' -位甲基化；而CrcCCoAOMT7-2则更倾向于催化槲皮素和黄烷酮底物，能够甲基化邻羟基类黄酮的6-、7-、8-、3'- 和4'-OH位点。此外，体外实验直接证明CrcCCoAOMT7-1催化合成了抗癌活性成分川陈皮素、甜橙黄酮和七甲氧基黄酮，为CCoAOMT家族中首个被证实具备该功能的酶。进一步通过瞬时过表达和VIGS（病毒诱导基因沉默）技术，验证了CrcCCoAOMT7-1/7-2可以促进柑橘体内多甲氧基黄酮的积累。

该研究证明CrcCCoAOMT7-1/7-2是一种多功能OMT酶，参与柑橘中多甲氧基黄酮的生物合成。这一结果不仅为完善柑橘多甲氧基黄酮的生物合成途径提供了新的资料，还对提升茶枝柑的药用价值以及通过酶工程合成天然抗癌活性物质具有重要指导意义。

相关论文信息：https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.143277