论文标题： Evaluation of the Effect of In Ovo Applied Bifidobacteria and Lactic Acid Bacteria on Enteric Colonization by Hatchery-Associated Opportunistic Pathogens and Early Performance in Broiler Chickens

论文链接：https://www.mdpi.com/2674-1164/4/2/15

期刊名：Poultry

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一、研究背景与意义

本研究旨在评估胚蛋注射（in ovo）双歧杆菌与乳酸菌对肉鸡出壳时肠道机会性病原菌定植及早期生产性能的影响。研究共开展4次试验，于胚胎发育第18天（DOE18）向羊膜腔内注射两歧双歧杆菌Bifidobacterium saeculare分离株（B2-2、B3-4）或乳酸菌（LAB18：Pediococcus acidilactici；LAB46：Lactobacillus salivarius），并采用环境攻毒模型在实验室条件下模拟商业化孵化柜中的微生物污染。结果表明，胚蛋注射益生菌可提高出壳雏鸡肠道中乳酸菌或双歧杆菌的数量；其中LAB46+B2-2组合在减少肠道革兰氏阴性菌和肠球菌方面效果最为突出，所有益生菌处理组均改善了14日龄体重（BW）和0–14日龄增重（BWG）。研究证实，在胚胎发育后期接触有益菌可阻止与商业化孵化柜污染相关的机会性病原菌定植，并有望改善肉鸡早期生产性能。

先驱定植菌是最早定植于胃肠道等“无菌”环境的微生物。在自然条件下，禽类通过母鸡泄殖腔或粪便中的微生物污染蛋壳、孵化和育雏阶段与母鸡的密切接触，以及泄殖腔饮入和食粪等行为获得母源菌群。然而，在商业化家禽生产中，种蛋产出后即被及时收集，雏鸡几乎无法接触母鸡菌群，其最初接触的是孵化环境中存在的非致病性和致病性微生物。由于孵化期间环境中的微生物构成了雏鸡胃肠道的先驱定植菌，控制孵化场微生物载量至关重要。已有研究表明，早期促进有益微生物在胃肠道定植可减少病原微生物的定植和排出，并与肠道发育成熟、肠道微生物组建立及免疫功能调节相关。目前，孵化场益生菌的施用方式包括胚蛋注射、出壳前喷蛋、出壳后喷雾或气雾，以及入舍后口服灌服或饮水给药；但在转运至农场前于孵化场施用具有时机优势，可避免环境来源微生物抢先定植。B. saeculare在鸡上的研究极少，本研究系首次将从抱窝（就巢）火鸡母鸡盲肠粪便中分离的B. saeculare菌株与LAB18或LAB46联合应用的尝试之一，并在攻毒模型中新纳入了已被证实可降低肉鸡早期性能的Enterococcus cecorum（EC7田间分离株），系统评估了不同益生菌菌株及组合对出壳肠道定植和早期性能的作用。

二、核心研究发现

1.出壳肠道菌群定植

试验1从10个处理组中初筛出优势组合，试验2–4进一步验证。各试验结果显示：LAB46+B2-2在试验3和试验4中均显著降低了肠道革兰氏阴性菌回收量（试验3：0.38 Log?? CFU/g vs. PM 组3.51；试验4：2.60 vs. PM组7.05，p<0.05）；试验4中LAB46+B2-2组肠球菌回收量也显著低于PM组（4.17 vs. 6.45，p<0.05）。含B. saeculare的处理组在试验2–4中均显著提高了出壳时双歧杆菌回收量，含乳酸菌的处理组则显著提高了乳酸菌回收量，表明益生菌剂量和给药途径有效。对试验2–4的Meta分析（n=36）进一步证实：NC组和LAB46+B2-2组是仅有的两个革兰氏阴性菌回收量显著低于PM组的处理；LAB46、LAB46+B2-2、LAB46+B3-4及LAB46+B-Combo均显著降低了肠球菌回收量。值得注意的是，并非所有组合均表现出叠加或协同效应：LAB18与双歧杆菌的组合在干扰革兰氏阴性菌定植方面效果不佳，作者推测可能与菌株间细菌素等抑制因子有关，但本研究未进行交叉抑制试验验证。

出壳雏鸡肠道细菌检出量Meta分析（试验2–4）

2.孵化率

试验2–4的校正孵化率在各处理组间无显著差异（p>0.05）。B. saeculare以1×10? CFU/枚的剂量单独或与乳酸菌联合于DOE18注射入羊膜腔，均未对胚胎后期发育或孵化率产生不利影响，这与既往研究中羊膜腔内注射 10⁶ CFU/枚B. animalis不影响孵化率的结果一致。

3.早期生产性能

在试验2中，LAB46、LAB46+B2-2和LAB46+B-Combo组的0–14日龄BWG显著高于PM组（分别为417.22 g、415.97 g、405.76 g vs. 375.83 g，p<0.05）；试验4中LAB46+B-Combo组7 日龄BW显著高于 PM 组（144.3 g vs. 134.0 g，p<0.05），0–14日龄BWG较PM组提高约20g（316.80 g vs. 296.80 g），但组间差异未达显著水平。各益生菌处理组14日龄BW均高于PM组（试验2：387.4–400.2 g vs. 358.9 g；试验4：360.6–365.2 g vs. 344.9 g），FCR在数值上亦有所改善。各组死亡率无显著差异。

三、研究总结

本研究结果表明，出壳前联合应用B. saeculare与乳酸菌可促进有益菌在雏鸡肠道的早期定植并改善生产性能，但菌株及组合的选择至关重要——叠加或协同效应并非必然出现，LAB46+B2-2是减少革兰氏阴性菌和肠球菌定植最为稳定有效的组合。研究同时指出，胚蛋注射益生菌对出壳肠道定植的影响与生产性能观测结果并不完全一致，反映了肠道发育、免疫调节和微生物组演替的复杂性。本研究使用的B. saeculare剂量（1×10⁸ CFU/枚）和给药途径（DOE18羊膜腔注射）对孵化率无负面影响，为孵化场早期益生菌干预提供了可行依据；但LAB18与双歧杆菌组合效果不佳的具体机制（如菌株间细菌素抑制）尚待后续交叉抑制试验加以阐明，相关研究正在进行中。

引用格式：

Rowland, M.C.; Teague, K.D.; Forga, A.J.; Higuita, J.; Coles, M.E.; Hargis, B.M.; Vuong, C.N.; Graham, D. Evaluation of the Effect of In Ovo Applied Bifidobacteria and Lactic Acid Bacteria on Enteric Colonization by Hatchery-Associated Opportunistic Pathogens and Early Performance in Broiler Chickens. Poultry 2025, 4, 15. https://doi.org/10.3390/poultry4020015

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Poultry 期刊介绍

主编：Prof. Dr. Michael Hess，Histovac GmbH, Austria; Retired from University of Veterinary Medicine Vienna, Austria

旨在发表涉及家禽健康、家禽福利和家禽生产力等相关领域的原创理论性和实验性研究成果。