■本报记者 王晨绯
12天可以用来做什么
中国科学家用12天的时间，研发制备了H7N9全病毒灭活疫苗。
4月8日至20日，呼吸疾病国家重点实验室研究人员在全球共享禽流感数据倡议组织（GISAID）获得H7N9病毒基因信息后，他们通过基因合成及利用反向遗传病毒拯救技术，在短短的12天里，就获得了供动物实验用的H7N9重组病毒疫苗株（AH-H7N9-PR8），制备了研究用灭活全病毒疫苗。
疫苗迫在眉睫
呼吸疾病国家重点实验室常务副主任陈凌向《中国科学报》记者介绍，目前，对抗流感病毒最主要的“三板斧”——奥司他韦、扎那米韦和帕那米韦都是通过抑制流感病毒的神经氨酸酶来控制病毒。使用达菲的最佳时间是发病后48小时之内。然而绝大多数流感患者确诊时已发病多日，临床上也观察到许多病人用药后的病毒载量仍居高不下。
2013年，复旦大学研究团队发现H7N9病毒对达菲已出现基因突变和耐药趋势。
达菲的有效性也存在争议。2014年4月，非营利性国际循证医学协作组研究人员在分析20项达菲的实验后，得出无证据支持达菲具有防止流感病毒传播或降低患者住院率和并发症风险作用的结论。该报告对世界上许多国家储备达菲以预防流感大流行的做法提出了质疑。
“作为临床学科的国家重点实验室，新发突发传染病出现后，最紧要的是应急救治，降低死亡率。”陈凌介绍说。呼吸疾病国家重点实验室正致力于该方面研究。该实验室是在中国工程院院士钟南山的倡议下，为适应呼吸疾病研究的发展趋势，由广州医科大学和中国科学院广州生物医药与健康研究院联合共建的。
2005年，国内发生了数起人感染H5N1禽流感的病例，多数病人最终死亡。但深圳有一例重症患者在接受了早前一位康复者的血浆后得以痊愈。
“毫无疑问，疫苗接种是预防流感病毒感染的最有效手段，前提是发生了大规模的人传人感染。”陈凌说。
“虽然以往疫苗企业生产人用流感疫苗的病毒株都是由WHO（世界卫生组织）提供。我们仍有必要尽早知道H7N9疫苗是否能有效诱导产生抗病毒抗体。”陈凌说。团队的研究表明，全病毒灭活疫苗在小鼠和猕猴中可诱导高滴度的抗H7N9中和抗体；通过添加氢氧化铝佐剂或者进行二次免疫，极低剂量的疫苗也可诱导高滴度的中和抗体。
在中国医学科学院实验室动物研究所秦川教授团队的协助下，研究人员在P3生物安全动物实验室里先给实验小鼠注射了由H7N9疫苗免疫小鼠和猕猴制备的抗血清，然后再用致死剂量的H7N9病毒攻击。结果显示，灭活重组全病毒疫苗可产生有效的免疫保护，同时也提示H7N9疫苗免疫者或康复者个体的血浆可以用于预防H7N9感染或治疗H7N9感染患者的可行性。
“除非H7N9流感病毒出现严重的人传人，大量生产及使用H7N9疫苗的可能性很低。我们开展的疫苗研究一方面证实了我们具备了技术能力，另一方面主要是用制备的疫苗株用来免疫马匹或猕猴来制备抗病毒血清制品。”陈凌说。
“流感病毒患者康复后的几个月内血液中含有较高的抗病毒中和抗体，所以如果将其血浆输给另一位病人可以迅速中和病人体内的病毒，从而帮助病人战胜病魔。”虽然如此，但陈凌知道禽流感的康复者有限，一方面不一定愿意捐献血浆，另一方面也要符合不是肝炎病毒及其他病毒携带者的条件。这给疫苗制备造成了现实困境。
未来可期
有没有办法在短时间内获得可以用于应急治疗的抗病毒抗体呢？研究人员把目光转向了体型庞大的马。它可以提供上万毫升血液而不影响其健康，而且马抗血清制品具有悠久的生产及使用历史。
从2013年4月起，呼吸疾病国家重点实验室与中国军事医学科学院军事兽医研究所开展了协作。在钟南山和夏咸柱两位中国工程院院士的大力支持下，科研人员立即在东北的马场用自己制备的灭活重组H7N9病毒疫苗免疫了数匹马。经测试，几次加强免疫后的马匹产生了效价过万的抗病毒抗体，而在H7N9 感染康复者血清测到的抗体效价通常仅有几百。科研人员从这些马匹提取了几万毫升血清。然而，马血清含有各种对人体而言的异体蛋白，具有高致敏性而不能被直接用于治疗病人。科研人员将马血清经过一系列步骤提纯出抗体免疫球蛋白，然后把与致敏最有关的Fc片段去除，这样就大大降低了致敏性。科研人员按照药典及制备生物制品的标准生产出了一批马抗H7N7精制免疫球蛋白，目前研究人员正在进行动物实验以确定其有效性和安全性。
“大自然总在和我们开玩笑。每次有新发突发传染病来袭，全国就如临大敌，动用甚至耗费了许多资源。从2003年的SARS冠状病毒，到几年前的H5N1，再到去年和今年的H7N9，虽然每次都是不同的‘狼来了’，却常常是各种轻重武器一起上。我们应该通过系统的研究，产生一套类似标准操作流程的临床应急救治应对措施。我期待未来新发突发传染病来袭时，我们的临床应急救治的技术手段可以更加成熟，最大限度降低重症及死亡率，应对成本也能降到最低。”陈凌相信，在钟南山的领导下，H7N9病毒疫苗的成功研发将指日可待。
《中国科学报》 (2014-05-12 第5版 创新周刊)
