作者:戚益军等 来源:《分子细胞》 发布时间:2012-5-21 13:19:35
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DNA甲基化通路研究获进展

 
2012年5月17日,清华大学生命科学联合中心戚益军研究组在《Molecular Cell》在线发表题为“Cytoplasmic Assembly and Selective Nuclear Import of Arabidopsis ARGONAUTE4/siRNA Complexes”的论文。该论文报道了拟南芥RNA介导DNA甲基化(RdDM)通路中,ARGONAUTE4/siRNA复合体在细胞质内组装和选择性进入细胞核的分子机制。
 
DNA甲基化作为一种高等生物中保守的表观遗传修饰,在维持基因组稳定性,调控基因表达和介导转基因沉默等生物过程中起着非常重要的作用。RNA介导的DNA甲基化(RdDM)是植物从头建立DNA甲基化的重要途径。在该通路中, siRNA从转座子等重复DNA序列区域产生(这些siRNA被称为heterochromatic siRNA, hc-siRNA),并与ARGONAUTE4(AGO4)蛋白结合形成效应复合体。AGO4/siRNA复合体可进一步招募DNA甲基转移酶DRM2等组分,特异性地识别同源DNA序列并介导甲基化修饰。由于hc-siRNA的产生和最终功能行使都在细胞核中进行,之前人们普遍认为RdDM通路是一个完全发生在细胞核中的过程。戚益军实验室在对拟南芥细胞质和细胞核中的小RNA组分进行系统分析的过程中,出人意料地发现:hc-siRNA主要存在于细胞质中,并且大部分以游离的双链形式存在;而在细胞核中则主要以与AGO4结合的单链形式存在。进一步的细胞和生化实验证明:在细胞质内,AGO4在HSP90蛋白的帮助下结合双链siRNA,然后通过其核酸内切酶活性切割并降解其中一条链,形成成熟的结合单链siRNA的AGO4效应复合体。siRNA的结合很可能导致AGO4构象发生变化,暴露出其核定位信号,细胞因此可以选择性的识别并转运成熟的AGO4/siRNA复合体至细胞核内。该研究揭示了RdDM通路中AGO4/siRNA效应复合体在细胞质内组装的重要步骤,推翻了以前人们认为RdDM通路完全在细胞核内进行的成见。该研究还表明,细胞选择性地转运成熟的AGO4/siRNA复合体进入细胞核,很可能是RdDM通路进入效应阶段之前的一个关键调控点。
 
与浙江大学联合培养的博士生叶瑞强和博士后王伟为该论文的共同第一作者,论文的其他作者还有博士生刘畅和技术员吴扬,日本国立农业生物科学研究所的Taichiro Iki和Masayuki Ishikawa博士,以及浙江大学的周雪平博士。戚益军博士为该论文的通讯作者,该项研究由科技部973项目资助。(来源:清华大学生命科学学院)
 
 
 
 
 
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