作者:Frank Bradke 来源:《自然—医学》 发布时间:2012-1-21 9:56:23
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新技术可让小鼠脊髓变透明
 
根据《自然—医学》(Nature Medicine)上在线发表的一篇文章,德国神经退行性疾病研究中心(DZNE)的研究人员采用一种新型方法,让固定的小鼠脊髓变得透明,这样他们就能看到3D的再生轴突轨迹,而无需进行组织切片。
 
脊髓是传递来自皮肤、肌肉和关节到大脑与背的信息的重要通路。神经轴突是贯穿大脑皮层和脊髓之间神经元的细长突出,分布于大脑和脊髓之间,为一种关键类型的神经纤维,参与皮质脊髓的构成和随意运动的实现。脊髓损伤后,沿皮质脊髓的轴突严重受损,从而导致位于损伤部位的下运动神经元与大脑失去有效功能链接。
 
然而,中枢神经系统中的再生研究受限于现有的组织学和成像技术,因为它们只能提供轴突和胶质细胞反应的部分信息。过去识别轴突再生的方法非常繁琐,因为它们需要精确的组织切片。这些方法对3D的轴突路线研究也是不够的,因为它们只能提供2D图像。
 
Frank Bradke领导的研究小组利用四氢呋喃(THF)溶剂来分解组织中的脂类,并利用GFP来照亮轴突的路径。为了使脊髓透明,样品随后浸泡在二氯甲烷以及苯甲醇苯甲酸苄酯中。
 
Bradke谈到:“有时你认为你看到了一个受伤的轴突,但它实际上是个幸免的轴突。这是一个大难题。临床前的结果很难判断,因为你只看到了片段。”
 
利用这种新的四氢呋喃方法,借助高分辨率的双光子显微镜,Bradke和他的同事获得了小鼠脊髓中神经细胞的3D图像。之后他们利用超显微镜追踪了标记轴突的轨迹。
 
为了了解轴突受损后的再生,研究小组让受损10天后的脊髓透明化,以便对再生的轴突进行3D成像。通过四氢呋喃方法,他们发现了大量的再生轴突,数量比切片方法更多。此外,通过周围轴突和中枢轴突中脊髓损伤的长期追踪,研究人员区分了再生和幸免的轴突。
 
这种技术也让研究人员能在脊髓受损后快速精确地对神经细胞计数,特别是小胶质细胞和星形胶质细胞。尽管这种透明化的步骤采用亲脂染料,但它不影响GFP小鼠中的荧光信号。
 
有了这种技术,Bradke希望能在小鼠模型上更准确地检测,以便在人类脊髓损伤时能够让轴突再生。此外,研究发现此过程也可应用在其他器官上,包括淋巴结、脾脏、肺、乳腺和肿瘤组织。(来源:生物通 薄荷)
 
 
 
 
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2012/1/28 11:09:35 dangping
不知能不能让植物细胞也透明?
2012/1/24 2:49:59 snowbirdven
还以为是活的透明脊髓...
2012/1/23 22:11:42 zhouligang
Nice Publication, which I want.
 
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