中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员王金勇团队联合北京干细胞与再生医学研究院副研究员胡房晓等研究人员，针对间皮素（MSLN）和CD33靶点双阳性的急性髓系白血病（AML），设计出环形双靶点嵌合抗原受体（CD33-MSLN Loop CAR，Loop CAR），并基于脐带血NK细胞（UCB-NK）或人多能干细胞（hPSCs）诱导的NK（iNK）细胞，制备出Loop CAR-NK或Loop CAR-iNK细胞。相关成果近日在线发表于《癌症免疫治疗杂志》（Journal for ImmunoTherapy of Cancer）。

CD33^KO-CD33-MSLN Loop CAR-iNK细胞精准靶向治疗急性髓系白血病。研究团队供图

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“Loop CAR-NK细胞能够有效杀伤MSLN阳性AML细胞。”论文共同通讯作者王金勇表示，该研究还进一步通过敲除hPSCs中的CD33基因，解决了Loop CAR-iNK细胞因靶向自身CD33抗原分子而引起的“自相残杀”的问题，为AML细胞治疗新策略提供了理论和技术依据。

AML患者通常年龄较大，不适合进行自体免疫细胞改造治疗。开发异基因CAR-NK细胞疗法治疗AML是重要的探索方向。目前，过继输注NK细胞治疗AML的研究已广泛开展。其中，CD33 CAR-NK细胞已在复发/难治性AML治疗中展现出初步的疗效与安全性。MSLN抗原在部分AML患者中高表达，成为AML治疗的潜在靶点。

为了提高CAR-NK细胞对MSLN⁺ AML的治疗效果，研究人员在国家重点研发计划、国家自然科学基金等项目的资助下，成功构建了同时靶向CD33和MSLN的“双导航”Loop CAR，然后利用逆转录病毒感染UCB-NK细胞制备出Loop CAR-NK细胞。实验证明，Loop CAR-NK细胞对CD33⁺ MSLN⁺ AML细胞系和患者原代AML细胞的杀伤能力显著优于单靶点CAR-NK细胞。scRNA-seq分析显示，与单靶点CAR-NK细胞相比，被肿瘤细胞刺激后的Loop CAR-NK细胞展现出更强的激活状态和细胞毒性活性。

hPSCs来源的iNK细胞质量均一、可现货供应，有望替代人体组织来源NK细胞。但UCB-NK细胞和hPSCs来源的iNK细胞均表达CD33，靶向CD33的CAR-NK细胞会互相攻击，导致扩增能力和活性受损。为此，研究团队利用基因编辑技术，在hPSCs中敲除CD33基因构建CD33^KO-hPSCs，再导入Loop CAR构建CD33^KO-Loop CAR-hPSCs，最终诱导分化产生CD33^KO-Loop CAR-iNK细胞。实验证明，CD33^KO-Loop CAR-iNK细胞扩增能力恢复正常，对CD33⁺ MSLN⁺ AML细胞的杀伤活性进一步提升。此外，CD33^KO-Loop CAR-iNK细胞在细胞系来源的异种移植肿瘤和人源肿瘤异种移植模型中，展现出更优越的抗肿瘤效果，显著延长了荷瘤小鼠的生存期。

相关论文信息：https://doi.org/10.1136/jitc-2025-011887