近日,华中农业大学动物医学学院教授何启盖和李文涛团队研究成果在《农业科学学报(英文)》 (Journal of Integrative Agriculture,JIA)在线发表。研究采用灭活非洲猪瘟病毒作为免疫原,成功制备出5株靶向p72蛋白的特异性单克隆抗体(命名为11F6、21B10、28H1、32G5、38C9),并证实所有单克隆抗体均能识别病毒感染的细胞。
鉴定B细胞表位对于开发新型非洲猪瘟病毒(ASFV)诊断工具及有效疫苗至关重要。作为已知最复杂的DNA病毒之一,ASFV具有多层结构,其庞大的基因组中包含大量功能未明的开放阅读框。
病毒衣壳主要由B646L基因编码的p72蛋白构成,约占病毒颗粒蛋白的三分之一,该蛋白不仅对病毒组装具有关键作用(异常表达会导致组装失败),还参与病毒入侵与免疫逃逸过程。凭借其高丰度与强免疫原性,p72与p54、p30蛋白共同构成自然感染中的主要抗原靶标,也是当前诊断检测的主要靶标。虽然已有部分针对p72的抗体报道,但仍需更全面研究p72的B细胞表位信息,以进一步推动诊断技术与疫苗设计的优化与创新。
该研究将单克隆抗体32G5所识别的抗原表位精确定位到p72蛋白的第130–152位氨基酸。该表位以GST融合蛋白形式表达后,可被32G5高效识别,并且与非洲猪瘟病毒感染后的阳性血清中也呈现强烈反应。
该研究首次报道了位于p72蛋白ER1区螺旋帽顶端的一个新型、高度保守的线性B细胞表位,且该B细胞表位可以被自然感染中产生的抗体强烈识别,可以作为诊断的靶标。
华中农业大学动物医学院博士研究生曹华为论文第一作者,何启盖和李文涛为共同通讯作者。该研究获得了国家重点研发计划项目、湖北省洪山实验室项目、农业微生物学国家重点实验室项目、中央高校基本科研业务金项目等项目的资助。
相关论文信息:https://doi.org/10.1016/j.jia.2025.10.024
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