作者:江庆龄 来源:华东师范大学 发布时间:2024/8/28 10:59:57
选择字号:
科学家开发高活性迷你基因编辑工具

 

华东师范大学生命科学学院研究员李大力团队,开发了一种全新的高活性迷你基因编辑工具,可在小鼠体内实现高效编辑,丰富了基因编辑工具的应用场景,为将来用于体内基因治疗提供了高效的候选技术。相关研究发表于《分子细胞》,并被选为封面文章。

以CRISPR/Cas9为代表的基因编辑技术,为基础生物学和疾病治疗带来了重大变革。2021年,张锋团队发现了由IS200/IS605转座子超家族编码的IscB核酸酶。IscB被认为是Cas9可能的进化祖先,具有与Cas9相似的结构域,且同样需要利用一段非编码RNA(ωRNA)引导蛋白识别DNA,而其氨基酸长度仅为SpCas9的三分之一左右。然而,IscB在哺乳动物细胞中的活性非常有限,能否通过工程化的改造提高IscB的基因编辑活性,达到与Cas9相当的活性,是当前需要解决的首要问题。

研究团队基于结构理性设计,在IscB蛋白关键位置引物氨基酸突变,经过三轮迭代筛选,获得了增强型IscB(命名为eIscB),eIscB的平均编辑效率较野生型平均可提高7.5倍。为提高IscB与目标DNA的亲和力,研究人员将eIscB与一个非序列特异性双链DNA结合蛋白融合,得到了高活性IscB(命名为eIscB-D),eIscB-D的最高编辑效率可达91.3%。

进一步地,研究人员对ωRNA的不同茎环结构进行改造,获得了高活性的ωRNA(命名为eωRNA),其长度较野生型缩短了20%,大幅降低了工业合成的难度。最终优化获得的eIscB-D/eωRNA编辑效率平均可提升20.2倍。

研究团队专门制备了小鼠白化疾病模型,并首次证明eIscB-D不仅可以在鼠源细胞系中产生高效编辑,还可以通过胚胎注射高效制备疾病动物模型。此外,研究人员开发了超高活性的微型单碱基编辑器eiABE和eiCBE,最高位编辑效率分别可达到73.6%和79.2%。

《分子细胞》封面。图片由研究团队提供

研究团队介绍,封面设计图以中国风为主基调,长街上的两列灯笼代表DNA双链,身形小巧玲珑的小朋友指代eIscB-D,多发卡结构的楼梯则是ωRNA。小朋友踩着楼梯,一手摘下旧灯笼,另一只手挂上新灯笼,这一精准而迅速的替换动作象征着eIscB-D高效、小巧、准确的特点。

相关论文信息:https://doi.org/10.1016/j.molcel.2024.07.007

 
版权声明:凡本网注明“来源:中国科学报、科学网、科学新闻杂志”的所有作品,网站转载,请在正文上方注明来源和作者,且不得对内容作实质性改动;微信公众号、头条号等新媒体平台,转载请联系授权。邮箱:shouquan@stimes.cn。
 
 打印  发E-mail给: 
    
 
相关新闻 相关论文

图片新闻
《自然》一周论文导读 新型纳米水凝胶可增强免疫系统肿瘤杀伤力
预见未来:“天关”卫星“前传” 跨能量尺度原子核结构研究获突破
>>更多
 
一周新闻排行
 
编辑部推荐博文