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科学家开发出新型定量蛋白质组学分析方法
作者:小柯机器人 发布时间:2020/11/26 11:45:11

美国威斯康星大学麦迪逊分校Joshua J. Coon、Jesse G. Meyer等研究人员合作开发出新型定量蛋白质组学分析方法。相关论文于2020年11月23日在线发表在《自然—方法学》杂志上。

研究人员发现,气相肽分离而非液相色谱可以实现快速蛋白质组分析。使用直接输注-霰弹枪蛋白质组分析(DI-SPA)和独立于数据的采集质谱仪(DIA-MS),研究人员证明了在质谱(MS)数据收集的几分钟内可以对500多种蛋白质进行靶向定量(每秒约3.5个蛋白质)。
 
研究人员在人类细胞培养物中营养素、基因型和线粒体毒素之间相互作用的复杂多因素蛋白质组学研究中应用了这项技术。仅在约4.4小时的MS数据收集中,研究人员从132个样品中进行了超过45,000次定量蛋白质测量。DI-SPA可在不使用液相色谱(LC)的情况下实现快速、无偏依的蛋白质组定量,从而提供了提高通量的方法,这对于需要对数千种蛋白质组进行分析的药物和生物标记物发现研究至关重要。
 
据介绍,液相色谱-质谱(LC-MS)可以对蛋白质组学进行灵敏的肽分析,但需要大量的分析时间,从而降低了通量。
 
附:英文原文

Title: Quantitative shotgun proteome analysis by direct infusion

Author: Jesse G. Meyer, Natalie M. Niemi, David J. Pagliarini, Joshua J. Coon

Issue&Volume: 2020-11-23

Abstract: Liquid chromatography–mass spectrometry (LC–MS) delivers sensitive peptide analysis for proteomics but requires extensive analysis time, reducing throughput. Here, we demonstrate that gas-phase peptide separation instead of LC enables fast proteome analysis. Using direct infusion–shotgun proteome analysis (DI-SPA) by data-independent acquisition mass spectrometry (DIA-MS), we demonstrate the targeted quantification of over 500 proteins within minutes of MS data collection (~3.5 proteins per second). We show the utility of this technology in performing a complex multifactorial proteomic study of interactions between nutrients, genotype and mitochondrial toxins in a collection of cultured human cells. More than 45,000 quantitative protein measurements from 132 samples were achieved in only ~4.4h of MS data collection. Enabling fast, unbiased proteome quantification without LC, DI-SPA offers an approach to boost throughput, critical to drug and biomarker discovery studies that require analysis of thousands of proteomes.

DOI: 10.1038/s41592-020-00999-z

Source: https://www.nature.com/articles/s41592-020-00999-z

期刊信息

Nature Methods:《自然—方法学》,创刊于2004年。隶属于施普林格·自然出版集团,最新IF:28.467
官方网址:https://www.nature.com/nmeth/
投稿链接:https://mts-nmeth.nature.com/cgi-bin/main.plex