近日,广东省科学院测试分析研究所(中国广州分析测试中心)研究团队联合中山大学、华北理工大学附属医院,成功研制出一种高选择性、高富集效率的环糊精聚合物固相微萃取(SPME)纤维,并将其与高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)联用。相关成果发表于《绿色分析化学》(Green Analytical Chemistry)。
环糊精聚合物固相微萃取纤维的绿色样品制备流程示意。研究团队供图
嘌呤作为DNA和RNA的基本组成单元,在细胞能量代谢和信号转导中发挥关键作用。嘌呤代谢紊乱与高尿酸血症、痛风性关节炎、2型糖尿病等多种疾病密切相关。然而,血清中嘌呤代谢物内源性丰度低、极性高,且基质干扰严重。传统蛋白沉淀结合高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)或液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的方法,主要依靠去除蛋白质来净化样品,无法对目标嘌呤进行选择性富集,残留的基质效应严重制约了检测灵敏度和数据可靠性。
针对上述难题,研究团队开发了基于环糊精聚合物固相微萃取的样品前处理技术,并结合HPLC-MS/MS建立了快速检测方法。该技术利用多孔结构与主客体识别协同作用,可高效捕获血清中痕量嘌呤,实现对六种嘌呤代谢物的同步精准定量。该方法操作简便、有机溶剂消耗低、富集效率高。
该SPME纤维涂层兼具多孔结构(比表面积达318.9 m2/g)与环糊精疏水内腔的主客体识别双重协同功能:多孔结构提供充足吸附位点,环糊精空腔选择性捕获嘌呤分子,二者协同作用实现对血清中六种嘌呤代谢物的高效富集。在相同条件下,其萃取效率显著优于商品化纤维。
结合HPLC-MS/MS分析,该方法可同步精准定量黄嘌呤、次黄嘌呤、黄苷、鸟苷、鸟嘌呤和腺嘌呤,检测限低至0.05 μg/L,加标回收率为77.0%~112.0%,重现性良好。单次分析仅消耗80 μL有机溶剂,较传统液相萃取大幅减少了有机溶剂使用量,为临床嘌呤代谢分析开辟了一条绿色高效的新路径。
研究人员指出,该方法为生物样品中嘌呤代谢物的测定提供了一种灵敏且实用的分析途径,对阐明嘌呤代谢紊乱的发病机制及促进早期临床诊断具有重要意义。
相关论文信息:https://doi.org/10.1016/j.greeac.2026.100375
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