| 《生物化学杂志》2008年283卷18期 |
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| RNA聚合酶在噬菌体Ф6中的起始定位 |
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Cystoviridae噬菌体中RNA依赖的RNA聚合酶在衣壳内部发挥复制和转录的双重作用,正如那些真核生物中的Reoviridae病毒。在噬菌体ф6中,内壳首先装配成带有5重凹陷顶点的二十面衣壳前体,随后在成熟过程中进行主要的结构变化。由三部分组成的基因组经由5重对称顶点的通道进入衣壳,包装成单链RNA分子,而且转录产物很可能通过同一路径从成熟衣壳中输出。
为了确定RNA酶(RdRP P2)在噬菌体ф6衣壳前体内的起始定位,美国国家卫生研究院(NIH)的Alasdair Steven及合作者对野生型及突变型衣壳前体进行低温电镜观察,并结合生化实验确定P2分子拷贝数。他们观察到在3重对称轴上有环状的强电子密度区,每一个噬菌体颗粒内大概含有10个拷贝的P2;在野生菌中,电子密度低,反映出的拷贝数低,每个病毒颗粒约含3个分子,并且在P2-0突变的衣壳中观察不到P2的电子密度。
这些电子密度的尺度和形状与已知的P2单体晶体结构的电子密度相符。因此他们提出,在噬菌体成熟过程中,P2分子不断转动直至占据邻近于5重对称顶点的位置,在那里指导复制和转录。这个方法对于研究活性生物大分子在体内精细的结构和功能无疑是新颖和直观的。
原文链接:http://www.jbc.org/cgi/conte-nt/short/283/18/12227(杨仁斌/编译)