| 《植物生理学》2008年133卷2期 |
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| 膜结合型八氢番茄红素脱氢酶以蛋白复合物存在 |
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八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是类胡萝卜素合成途径中的关键酶,催化无色的八氢番茄红素转变为有色的类胡萝卜素。在水仙等植物中存在两种形式的PDS:不具酶活性的可溶型及具有酶活性的膜结合型。尽管研究表明,水仙花及豌豆中可溶型的PDS为蛋白复合物且与热激蛋白(HSP70)或叶绿体伴侣蛋白(Cpn60)有联系,但是膜结合型的PDS是否也以蛋白复合物形式存在?若是,则其确切大小为多大?这些问题目前仍不清楚。
康奈尔大学的研究人员首先从花椰菜、番茄、胡萝卜及拟南芥中克隆到PDS的基因序列,通过实时定量荧光PCR检测花椰菜PDS基因(BoPDS)在不同组织中的表达水平,Western杂交分析不同组织中PDS的表达量。然后分离、纯化花椰菜突变体、番茄果实及胡萝卜根部中的色素体,利用蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电冰(Bn-PAGE)分离并分析色素体蛋白质复合体。研究发现,与其他植物的PDS相比,花椰菜的PDS的酶活性相对较高且其在质体中的表达不受类胡萝卜素含量的影响。电泳及杂交结果表明,花椰菜、番茄及胡萝卜中的PDS也存在两种形式,与水仙花及豌豆的相同。而且,膜结合型的PDS以约350kDa大小的蛋白复合物形式存在,基质中可溶型的PDS则以660kDa大小的蛋白复合物形式存在。
原文链接:http://www.blackwell-synergy.com/doi/full/10.1111/j.1399-3054.2008.01058.x (卓加金/编译)